Pozytywna pętla sprzężenia zwrotnego FGFR3 / FOXN1 leży u podłoża łagodnego rogowacenia skóry w porównaniu z powstawaniem raka płaskokomórkowego u ludzi ad

Co ważne, identyczne mutacje FGFR3 były również związane z innymi nowotworami nabłonkowymi, w tym rakiem pęcherza, z dobrym rokowaniem i brakiem złośliwej progresji (27-29). Odwrotnie, te same aktywacje FGFR3 powiązano z progresją choroby niektórych nowotworów krwiotwórczych, w tym szpiczaka mnogiego (30, 31). Podstawa dla tych specyficznych dla komórek typu konsekwencji aktywacji FGFR3 na rozwój nowotworu pozostaje wyjaśniona. FOXN1 jest członkiem rodziny czynnika transkrypcji, który pełni zasadniczą funkcję w różnicowaniu keratynocytów (32. 35) i rozwoju nabłonka grasicy (36), z mutacjami genu FOXN1, co skutkuje nagim fenotypem u myszy, szczurów i ludzi (37. 39). FOXN1 działa jako aktywator transkrypcji, ponieważ zawiera specyficzną dla sekwencji domenę wiążącą DNA i ujemnie naładowany motyw transaktywacji (35, 40). FOXN1 promuje wczesne etapy programu różnicowania końcowego keratynocytu i hamuje późniejsze etapy, poprzez wzajemne oddziaływanie ze szlakami sygnałowymi PKC i / lub Akt (32. 35). Inną nową funkcją FOXN1 w keratynocytach jest ich rola jako modulatora pigmentacji skóry (41). W przeciwieństwie do normalnego programu różnicowania keratynocytów, nic nie wiadomo o roli tego czynnika transkrypcyjnego w rozwoju nowotworu. Stosując kombinację metod biochemicznych i funkcjonalnych, informujemy o istnieniu podwójnie pozytywnej pętli regulacyjnej pomiędzy ekspresją FOXN1 i aktywacją FGFR3, która leży u podstaw łagodnego i złośliwego fenotypu nowotworu skóry. Wyniki Zderegulowana ekspresja genów w łagodnych i złośliwych nowotworach skóry. SCC skóry jest jednym z najczęstszych nowotworów w świecie zachodnim (1). Oprócz nowotworów złośliwych, subpopulacje keratynocytów mogą powodować łagodne nowotwory skóry, takie jak SK, które bardzo rzadko, jeśli w ogóle, stają się nowotworami złośliwymi. Porównując wzorce ekspresji genów, odkryliśmy, że wiele genów zaangażowanych w kontrolę pozytywną wzrostu keratynocytów i kancerogenezy, takich jak te dla EGFR i p63 (6, 7), uległo podwyższeniu zarówno w SK, jak i SCC (Ryc. 1, A i B ). Odwrotnie, inne ważne geny regulatorowe były różnie wyrażane w SK w porównaniu z SCC. Należą do nich Notch1 (ryc. 1C), który poprzednio wykazano jako downmodulowany w SCC (9), ale zamiast tego był regulowany w górę w SK i p53 (rysunek 1D), kluczowy regulator pozytywny ekspresji Notch1 w keratynocytach (9, 10, 42). ). Integryna a 6 i kinaza białkowa wiążąca CDC42. (MRCK .), 2 kluczowe ujemne cele wycinania w tych komórkach (9), były również podwyższone w SCC, ale wykazywały normalne lub zredukowane poziomy w SK (Figura 1, E i F). Figura 1. Profil ekspresji genów uprzednio związanych z tworzeniem guza keratynocytów w zmianach SK w stosunku do SCC. RNA wyekstrahowane z 7 oddzielnych zmian SK, 4 oddzielnych chirurgicznie wyciętych zmian SCC i 3 prawidłowych, dopasowanych wiekowo kontrolnych naskórek poddano RT-PCR w czasie rzeczywistym dla wskazanych genów, z p-aktyną do wewnętrznej normalizacji. Wartości SK i SCC wyrażono jako fałdy wyrażenia w stosunku do średniej z 3 normalnych kontroli. Paski błędów oznaczają SEM. Chociaż nasza poprzednia praca wskazuje na funkcjonalne znaczenie Notch1 i p53 w negatywnej kontroli rozwoju guza keratynocytów (9, 11), ich ekspresja w SK wzrosła tylko kilkakrotnie. Powyżej tych genów postawiliśmy hipotezę, że mogą istnieć inne osoby z głębszą regulacją w tych zmianach. W rzeczywistości, analiza mikromacierzy cDNA wielu niezależnych zmian SK w porównaniu ze zwykłymi kontrolami naskórka wskazała na ograniczony podzbiór genów o drastycznie zwiększonej ekspresji w SK (Tabele Uzupełniające i 2, materiał uzupełniający dostępny online w tym artykule; doi: 10.1172 / JCI38543DS1). Oprócz genów o nieznanej lub niepewnej funkcji w skórze, należą one do FGFR3, który wcześniej był zaangażowany w patogenezę SK (20) i FOXN1, czynnik transkrypcyjny odgrywający kluczową rolę w kontroli różnicowania keratynocytów (32, 33, 35) . RT-PCR w czasie rzeczywistym potwierdził, że geny te były silnie regulowane w górę w SK i pokazały, że, przeciwnie, FOXN1 i FGFR3 były tłumione w SCC (Figura 2, A i B). Równolegle do wyników ekspresji mRNA, analiza immunofluorescencyjna z przeciwciałem anty-FOXN1 potwierdziła, że SK wyrażają wysokie poziomy tego białka, które zostały wykryte w bardzo niewielu komórkach w SCC (Figura 3 i Suplementowa Figura 1). Immunofluorescencja z przeciwciałami swoistymi dla FGFR3 dawała podobnie wysoki sygnał w SK, podczas gdy barwienie w SCC było bliskie niewykrywalnego (figura 3 i dodatkowa figura 1). Figura Poziomy mRNA 2FOXN1 i FGFR3 są modulowane różnicowo w zmianach SK w stosunku do SCC
[przypisy: 23 114 jabłonna, gops jabłonna, jakie spodnie do biegania ]
[przypisy: miód nawłociowy właściwości lecznicze, zapalenie stawów u dziecka, dieta wątrobowa lekkostrawna ]