Niezależna od dopełniacza indukowana przez Ab indukcja płytek krwi przez nadtlenek wymaga 12-lipooksygenazy i szlaku oksydazy płytkowej NADPH

Antypłytkowe GPIIIa49 . 66 Ab pacjentów z małopłytkowością związaną z HIV indukuje trombocytopenię i fragmentację płytek krwi przez wytwarzanie nadtlenku i innych reaktywnych form tlenu (ROS). Poniżej przedstawiamy obecność funkcjonalnego szlaku płytkowej oksydazy NADPH, który wymaga aktywacji szlakiem 12-lipooksygenazy (12-LO) płytek krwi w celu fragmentacji płytek krwi. Opisano nowy mechanizm za pośrednictwem Ab, w którym produkt płytkowy 12-LO, 12 (S) -HETE aktywuje szlak oksydazy NADPH do generowania ROS. Wprowadzenie Pacjenci z zakażeniem HIV-1 często rozwijają małopłytkowość immunologiczną (HIV-1-ITP) (1). Badania dotyczące przeżycia płytkowego wskazują, że wczesny początek HIV-1-ITP jest często spowodowany zwiększonym obwodowym zniszczeniem płytek krwi, podczas gdy u pacjentów z AIDS istnieje większe prawdopodobieństwo zmniejszenia wytwarzania płytek krwi (2). Wczesny początek HIV-1-ITP jest klinicznie nie do odróżnienia od klasycznej idiopatycznej małopłytkowości autoimmunologicznej (AITP) i reaguje na te same środki lecznicze stosowane w leczeniu klasycznego AITP (1, 3. 6). HIV-1-ITP różni się od klasycznego AITP, jednak w odniesieniu do znacznie podwyższonej IgG związanej z płytkami, IgM, C3, C4 oraz obecności krążących kompleksów immunologicznych (CIC) złożonych z tego samego (3, 4). Wcześniejsze badania ujawniły, że kompleksy te zawierają również integrynę przeciwpłytkową GPIIIa (y3) Ab i jej blokujący antyidiotyp Ab (7, 8). Oczyszczanie powinowactwa Ab i mapowanie epitopów GPIIIa ujawniło wysoki powinowactwo Ab IgG1 wobec reszt GPIIIa 49. 66 (7, 9). Obecność tego Ab koreluje odwrotnie z liczbą płytek (r = 0,71) i indukuje ciężką trombocytopenię po wprowadzeniu do myszy (9) (mysi GPIIIa ma 83% homologii z ludzkim GPIIIa i makrofagami z receptorami Fc dla ludzkiej IgG1). Pasywnie indukowanej małopłytkowości mysiej można zapobiegać lub odwracać za pomocą peptydu GPIIIa49 . 66 (9), jak również Ab blokującego pacjenta wobec antybiotyków (8). Krążące kompleksy immunologiczne od pacjentów z wczesnym początkiem HIV-1-ITP zawierają fragmenty płytek krwi (10). Wykazaliśmy również, że oczyszczone przez powinowactwo anty-GPIIIa49 . 66, w nieobecności dopełniacza, może indukować fragmentację płytek in vitro i in vivo (10). Ta intrygująca obserwacja doprowadziła do odkrycia, że indukowana przez Ab fragmentacja płytek była spowodowana wytwarzaniem nadtlenku i innych reaktywnych form tlenu (ROS). Generowanie ROS wydawało się być związane z obecnością aktywnego szlaku oksydazy NADPH w płytkach krwi, ponieważ in vivo fragmentacja płytek nie pojawiła się u myszy z niedoborem fagocytarnej oksydazy p47 (p47phox) składnika szlaku NADPH (p47phox. /.) a małopłytkowość in vivo była około 60% mniejsza niż uzyskana u myszy WT (10). Mechanizm prowadzący do aktywacji ROS nie został jednak zdefiniowany ani nie było jasne, czy aktywność ROS pochodzi z płytki krwi lub z innego źródła. Oksydaza NADPH granulocytów / makrofagów składa się z pięciu głównych składników, które łączą się w komórkę lub błony wakuolarnej, tworząc aktywny donor elektronów, w którym generowany jest nadtlenek 02 (11). Trzy cytoplazmatyczne składniki phox, p47phox, p67phox i p40phox, przemieszczają się do cytoplazmatycznej powierzchni błony (12-16) w niezależnym połączeniu z aktywowanym białkiem Rac G. Rac wiąże się z p67phox (17), a następnie wiąże się z dwoma komponentami zlokalizowanymi w błonie, gp91phox i p22phox,. i . podjednostki kompleksu cytochromu b (18, 19). Ten kompleks może wiązać NADPH i dinukleotyd flawonadeninowy (FAD) (11, 20, 21). Wymaganych jest kilka enzymów do aktywacji układu po zaburzeniu przepuszczalności błony różnymi ligandami fizjologicznymi (fMLP, C5a, PAF, leukotrienem B4 [LTB4], IL-8), które wiążą się z wrażliwym na PTX wrażliwym na PTX białkiem sprzężone receptory (22). Aktywacja zależy od mediatorów lipidowych, takich jak kwasy fosfatydowe i arachidonowe oraz fosfatydyloinozytolu (23. 25). Zaangażowane enzymy obejmują PI3K, którego produkty tworzą rusztowanie do przyłączenia błon z p40phox i p47phox (26-28); kinaza białkowa C, która fosforyluje p47phox, umożliwiając jego translokację do błony (29. 31); cytosolic fosfolipaza A2 (cPLA2), która wytwarza kwas arachidonowy z fosfolipidów błony komórkowej (32), służąc do aktywacji połączenia p47phox z p22phox (23). Do fosforylacji i aktywacji cPLA2 (33-36) wymagana jest kinaza pozakomórkowa regulowana sygnałem (ERK) i kinaza białkowa aktywowana mitogenem p38 (p38 MAPK). Zarówno w komórkach fagocytujących, jak i nieagresywnych, cPLA2 bierze udział w generowaniu leukotrienu B4 (LTB4), który wydaje się być wymagany do wytwarzania ROS i chemotaksji (37)
[patrz też: fazy choroby alkoholowej, gops jabłonna, zapalenie stawów u dziecka ]
[przypisy: przychodnia jabłonna, pierwsze posiłki niemowlaka, jakie spodnie do biegania ]