Brak sygnalizacji receptora prolaktyny u myszy powoduje proliferację laktotropową i prolactinoma przez mechanizmy zależne i zależne od dopaminy

Podwzgórzowa dopamina hamuje sekrecję prolaktyny przysadkowej i proliferację komórek laktotropowych produkujących prolaktynę poprzez aktywację receptorów D2 laktotropowych (D2R). Odwrotnie, prolaktyna (PRL) stymuluje podwzgórze neuronów dopaminowych poprzez receptory PRL (PRLR) w obwodzie sprzężenia zwrotnego z krótką pętlą. Użyliśmy Drd2. /. i Prlr. /. zmutowane myszy pomijają tę informację zwrotną i badają możliwe niezależne od dopaminy działanie PRL na funkcje laktotrofowe. Brak obu receptorów wywołał hiperprolaktynemię i duże prolactinoma u kobiet. Małe makrogruczołaki rozwinięte w wieku Prlr. /. mężczyźni, ale tylko mikroskopijne gruczolaki stwierdzono w Drd2. /. samce myszy. Badania farmakologiczne w Prlr. /. myszy z agonistami i antagonistami D2R wykazały znaczną utratę endogennego tonu dopaminy, tj. konstytutywną sygnalizację hamowania przez D2R w przysadce mózgowej. Jednak Prlr. /. myszy wykazywały głębszą hiperprolaktynemię i większe nowotwory niż dopasowany wiekowo Drd2. /. myszy i pojawiły się addytywne efekty u homozygotycznych zmutowanych samców myszy. W warunkach in vitro traktowanie PRL znacznie zahamowało proliferację samic i samców Drd2. /. laktotrofy, ale nie miały wpływu na samicę Drd2. /. laktotrofy, co sugeruje obniżenie lub desensytyzację PRLR w odpowiedzi na chroniczną hiperprolaktynemię. Wnioskujemy, że PRL hamuje laktotrofy dwoma różnymi mechanizmami: (a) pośrednio przez aktywację podwzgórzowych neuronów dopaminowych i (b) bezpośrednio w przysadce mózgowej w sposób niezależny od dopaminy. Wstęp Gruczolaki laktotropowe (prolactinoma) są najczęstszymi guzami przysadki mózgowej (1), ale ich patogeneza pozostaje nieuchwytna. Pierwotna regulacja sekrecji prolaktyny (PRL) jest mediowana przez hamujące działanie dopaminy uwalnianej z medianowej pozycji podwzgórza i działającej na podtyp receptora D2 dopaminy (D2R) (2). Myszy z niedoborem receptora D2R (myszy Drd2a / y) wykazywały wcześniej hiperprolaktynemię, przerost laktotropowy i prolactinomy (3, 4), potwierdzające kluczową rolę aktywacji receptora podwzgórzowego dopaminy i dopaminy w fizjologicznej regulacji proliferacji laktotropowej. i wydzielanie PRL. Jednakże postulowano zaangażowanie szeregu innych czynników regulacyjnych, w tym samej PRL (5). PRL zwiększa podwzgórze przysadkowe napięcie dopaminy, tj. Konstytutywną hamującą sygnalizację przez D2R i zmniejsza wydzielanie PRL (6. 8) poprzez zmianę ekspresji (9) i aktywności (7) hydroksylazy tyrozynowej (TH), enzymu ograniczającego szybkość w syntezie dopaminy. Oprócz pośrednich efektów, w których pośredniczą zmiany dopaminy w podwzgórzu, postawiliśmy hipotezę, że PRL może mieć bezpośredni wpływ na przysadkę mózgową. Receptory PRL (PRLR) wykazano w przednim płacie przysadki u wielu gatunków, w tym u myszy (10, 11), i stwierdzono je szczególnie na laktotrofach u szczurów (12) iu ludzi (13). Jego wpływ na proliferację innych typów komórek jest różny, ale w przeważającej mierze stymulujący (14-25), z wyjątkiem jajnika (26, 27), nadnercza (28) i śródbłonka naczyniowego (29). Chociaż postulowano, że PRL może odgrywać autokrynną lub parakrynową rolę w proliferacji laktotroficznej (11), istnieją ograniczone empiryczne dowody potwierdzające tę teorię. Eksperymenty oceniające bezpośredni efekt przysadki PRL in vivo są trudne ze względu na równoczesny wpływ na dopaminę podwzgórzową. Przez krzyżowanie myszy z niedoborem PRLR (Prlr. /.) Z Drd2. /. myszy, byliśmy w stanie ocenić możliwy wkład niezależnych od dopaminy efektów sygnalizacji PRL na kontrolę sekrecji PRL i wzrostu laktotropowego. Metody Wytwarzanie myszy z niedoborem receptora. Generowanie Drd2. /. i Prlr. /. myszy przez ukierunkowanie na geny w embrionalnych komórkach macierzystych opisano wcześniej (3, 30). Każda linia myszy z niedoborem receptora była niezależnie krzyżowana wstecznie ze wsobnymi myszami C57BL / 6J przez pięć lub więcej pokoleń w celu wytworzenia początkowych linii kongenicznych i zmniejszenia zmienności od epistazy genu. Z powodu upośledzenia płodności, laktacji (30, 31) i zachowania matek (32) w Prlr. /. myszy, selektywną strategię hodowlaną i włączenie matek zastępczych CD-1 zastosowano w krzyżówkach w celu wytworzenia kohorty rodzeństwa typu dzikiego, Drd2a / p, Prlrp / p, i mutanta związku (Drd2a / P, Prlr. / .) myszy do tych badań. Wszystkie praktyki w zakresie opieki nad zwierzętami i procedury eksperymentalne zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Opieki i użytkowania zwierząt Oregon Health & Science University. Oznaczanie PRL surowicy. Surowicę uzyskano w krótkim znieczuleniu izofluranem z krwawienia z ogona i zamrożono w temperaturze <80 ° C aż do analizy [hasła pokrewne: miód nawłociowy właściwości lecznicze, powiększanie biustu tłuszczem, zapalenie stawów u dziecka ] [więcej w: królik miniaturka baranek, jarhead żołnierz piechoty morskiej cda, kolonoskopia przygotowanie do badania ]