Blokada dehydrogenazy 11 (3-hydroksysteroidowej zapobiega strukturalnej strukturze skóry i wadom funkcji wywołanym przez wiek cd

Nie badano wcześniej regulacji homeostazy kolagenu (np. Modyfikacji posttranslacyjnej, transportu i dojrzewania zewnątrzkomórkowego) przez fizjologiczne stężenia endogennego GC. Leczenie kortyzolem (100 nM) w HDF (n = 5) obniżonej ekspresji mRNA genów na różnych etapach syntezy i przetwarzania dojrzałego kolagenu (Tabela 1). Obejmowały one prolyl (LEPREL1, LEPREL2 i P4HA2, odpowiednio o 80%, 33% i 36%) i hydroksylazy lizylowe (PLOD2; 53% zmniejszenie), które hydroksylują reszty proliny i lizyny na powstających propagenach kolagenu, które ułatwiają helikalny trimeryczny montaż prokolagenu. Zauważyliśmy również tendencję do zmniejszonej ekspresji mRNA hydroksylazy LEPRE1, P4HB i PLOD1. Tabela Geny docelowe regulowane przez GC w hodowanych fibroblastach pogarszają biosyntezę i przetwarzanie kolagenu Transport i sekrecja nowo powstałych hellik prokolagenu są wspomagane przez specyficzny dla kolagenu chaperon HSP47 (SERPINH1), który również wykazywał zmniejszoną ekspresję po traktowaniu GC. Po wydzieleniu do środowiska pozakomórkowego kończy się niezdolny prokolagen. są cięte przez peptydazy kolagenowe związane z błoną (ADAMTS2 i BMP1), które nie wydają się być regulowane GC. Otrzymane peptydy tropokolagenu są sieciowane przez oksydazy lizylowe (LOX i LOXL1-4), które wykorzystują reszty lizyny i hydroksylizyny do tworzenia wiązań kowalencyjnych w powstałej włókienie kolagenowej. Co ciekawe, ekspresja mRNA dla wszystkich 5 oksydazy lizylowej została zmniejszona przez traktowanie GC, z obniżeniem w zakresie od 31% do 53%. Stabilność włókienek kolagenowych jest dodatkowo wspierana przez proteoglikany, takie jak dekorin (DCN), które wykazywały 2,7-krotną indukcję ekspresji mRNA po leczeniu GC. MMP i ich inhibitory degradujące kolagen były także regulowane GC, ze zmniejszoną ekspresją MMP1 (71%), MMP12 (44%) i TIMP3 (64%) i 4,6-krotną indukcją TIMP4. Stwierdziliśmy, że MMP8 i MMP10 również wykazywały tendencję odpowiednio do indukcji i redukcji za pośrednictwem GC. Indukowane przez wiek zmiany w ekspresji genów biosyntezy kolagenu są ratowane u myszy 11-HSD1 KO. W skórze myszy ekspresja kolagenu (Col1a1) nie była zależna od wieku ani od genotypu 11 (3-HSD1 (Figura 5D), ale stwierdziliśmy indukowany przez wiek 64% spadek ekspresji hydroksylazy prolilowej skóry (Leprel1), który został całkowicie przywrócony w wieku Myszy 11-HSD1 KO do poziomów porównywalnych do młodych zwierząt (Figura 5A). Podobnie, ponad 90% zmniejszenie ekspresji hydroksylazy lizylowej (Plod1) w skórze w wieku WT zostało również częściowo uratowane u myszy z miotu KO (Figura 5B). Figura 5 Ulepszona ekspresja genów syntezy kolagenu u starzejących się myszy o masie 11 p-HSD1a. (A) Ekspresja hydroksylazy prolilowej LEPREL1 zmniejszyła się u myszy WT wieku (n = 3) w porównaniu do młodszych zwierząt (n = 5). To było odwrócone w wieku myszy KO (n = 4). (B) Podobnie, wywołane przez wiek obniżenie ekspresji PL 21 PL hydroksylazy lizylowej zostało częściowo uratowane u starzejących się myszy KO. (C) Ekspresja TIMP4 była również zmniejszona w wieku WT, ale nie KO, myszy w stosunku do młodych myszy WT. (D) Ekspresja COL1A1 była niezmieniona z wiekiem lub genotypem. (E i F) Obserwowano również spadek MMP2 i MMP3 wywołany wiekiem, ale genotyp nie miał na nie wpływu. * P <0,05; ** P <0,01; *** P <0,001. NS, nieistotne. Ekspresja Timp4 była również zmniejszona o około 80% u starzejących się myszy WT, ale nie u myszy KO (Figura 5C). Przeciwnie, wywołana wiekiem regulacja w dół ekspresji Mmp2 i Mmp3 nie uległa zmianie u zwierząt z KO (Figura 5, E i F). Miejscowa blokada endogennej aktywacji GC przyspiesza gojenie się ran in vivo. Masa ciała w każdym punkcie czasowym była nieodróżnialna między grupami traktowanymi zaróbką i inhibitorem (dane nie pokazane). Morfologia rany brutto wykazała przyspieszone zamknięcie u myszy leczonych inhibitorami 11 (3-HSD1 (Figura 6A). Rzeczywiście, przyspieszoną ponowną epitelializację (w zakresie od 35% do ponad 100%) obserwowano u zwierząt leczonych inhibitorami w każdym zmierzonym punkcie czasowym. Przykładowo, obszar neoepidermy po 14 dniach od zranienia wynosił 23% u myszy leczonych podłożem, ale zwiększał się do 50% po zablokowaniu 11 (3-HSD1 (P <0,001; n = 12) (Figura 6B). Ponadto, podczas gdy myszy leczone podłożem wymagały 18 dni, aby osiągnąć 40% ponowne nabłonkowanie, blokada 11 (3-HSD1 zmniejszyła ten czas o ponad tydzień, osiągając podobny poziom powrotu do dnia 9. Figura 6 Przyspieszone gojenie się rany w 11 (3-HSD1 myszy traktowane inhibitorem. (A) Reprezentatywne obrazy pokazujące lepsze zamykanie ran u myszy leczonych co 2-3 dni z 1% RO151. (B) Przy każdym zmierzonym punkcie czasowym rejestrowano przyspieszoną re-epithelialization (n = 5. 12) [patrz też: zapalenie gardła u dzieci, oszczędzanie dla dziecka, miód nawłociowy właściwości lecznicze ] [hasła pokrewne: przepuklina brzuszna pooperacyjna, miód nawłociowy właściwości lecznicze, zapalenie stawów u dziecka ]